Они были младшими сыновьями равноапостольного великого князя Владимира. Родившиеся незадолго до Крещения Руси братья принадлежали к самому первому поколению русичей, воспитанных в христианской вере. Когда они достигли совершеннолетия, отец поставил Бориса князем в Ростов, а Глеба — в Муром.
Однажды разведчики донесли Владимиру о том, что на Русь идут степные кочевники печенеги. Великий князь был в ту пору тяжело болен. Понимая, что сам он не сможет встать во главе войска, Владимир вызвал из Ростова Бориса, дал ему в подчинение свою дружину и отправил в поход против печенегов.
Вскоре святой князь Владимир скончался. В это время в Киеве находился его старший сын Святополк. Он объявил себя великим князем Киевским.
Борис и Глеб заявили о своей верности новому киевскому князю и обязались «чтить его как отца своего». Однако всё равно Святополк, опасаясь соперничества со стороны своего брата Бориса, подослал к нему убийц. Борис был извещен о таком вероломстве, но не стал скрываться и, подобно мученикам первых веков христианства, с готовностью встретил смерть. Убийцы настигли его, когда он молился за утреней в воскресный летний день в своем шатре на берегу реки Альты. Они ворвались в шатер к князю и пронзили его копьями. Но святой Борис был еще жив. Выйдя из шатра, он попросил у своих палачей позволить ему закончить молитву. Помолившись, он обратился к убийцам: «Подходите, братия, кончите и вы службу свою, и да будет мир брату Святополку и вам».
После этого Святополк умертвил ещё одного своего младшего брата — Глеба. Обманом вызвав его из Мурома, Святополк послал ему навстречу убийц. Глеб уже знал о кончине отца и злодейском убийстве Бориса, но также предпочел войне с братом собственную смерть. Со своими убийцами святой Глеб встретился в устье реки Смядыни, неподалеку от Смоленска. Захватив его ладью, наемники Святополка силой принудили к убийству Глеба его собственного слугу.
Почитание благоверных князей-страстотерпцев Бориса и Глеба восходит к первой половине XI века, а общее празднование памяти святым князьям, 6 августа, встречается в месяцесловах с начала XII века. Они — первые святые, которых канонизировала наша Церковь. Как христиане, они не пожелали участвовать в междоусобной войне со своим старшим братом, кротко приняли мученическую смерть и простили своих убийц.